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高速液体クロマトグラフィー（HPLC）は、混合物から物質を分離するために使用されるツールです。特定の化学物質の分離と同定は、主にシステムのクロマトグラフィーカラムで行われます。 CLAEには多くのカラムタイプがあり、それぞれが特定のタイプの分析に使用されます。 C18カラムは、一般的に使用される最強の非極性カラムです。長時間連続使用した後は、溶剤の流量が減少し、分析時間が長くなります。分析時間の短縮のもう1つの原因は、カラム材料に少量の化学物質が残っているため、それらを分離する能力が低下することです。表面の修復は、材料を一連の特定の溶媒で処理して、残っているサンプルから材料を除去し、支持材料を活性化することで実行できます。
ステップ1
カラムC18を流れ方向から取り外し、反対方向に置きます。溶剤を戻すことで、時間の経過とともに発生する蓄積効果が緩和されます。カラムの端に蓄積された物質が多すぎないように注意する必要があります。一部の工場では上部でより大きなメッシュを使用しているため、流れの方向が変わると、メッシュは下の位置に配置されます。この復元方法を逆流と呼びます。蓄積がシステム検出器に流れ込み、場合によっては閉塞を引き起こすのを防ぐには、検出器を接続せずに機能させ、カラムからの流れを廃棄に向けます。
ステップ2
一連の溶媒に溶媒通過チューブを置き、カラムに保持されている化合物を反対方向に溶出します。これらの溶媒は、親水性の特性が異なります。それらを変えることにより、同等に多様な親水性の化合物を溶出します。次の各溶媒を順次50 ml使用します。水（バッファーを使用している場合）、メタノール、イソプロパノール、ジクロロメタン、ヘキサン、ジクロロメタン、イソプロパノール。
ステップ3
カラムを正しい方向に交換し、溶媒をカラムに流します。続行する前に、少なくとも75 mlを使用して洗浄してください。新しいときに使用したパターンでテストし、結果を確認します。最大保持ポイントと合計分析時間に到達するときは注意してください。まだ新しいときにこれらの属性が初期テストに一致する度合いは、列が復元された度合いを示します。結果が満足のいくものでない場合は、カラムを新しいものと交換し、古いものを捨てます。
