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• 必要なもの

高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、試料がカラムを通過するときに試料がその化学成分に分離される一般的な実験室分析法である。このカラムは多孔質材料、典型的にはシリカゲルで充填されている。 C8のような標準的な逆相カラムは時々目詰まりしたり汚染されたりします。これらの列は非常に単純な手法を使用して取得できます。

説明書

適切な溶媒は汚れたカラムを回収することができます （Jupiterimages / liquidlibrary / Getty Images）

列を回復する

1. カラムを外して位置を逆にすると、移動相はカラムのアウトプットであるものを通って入ります。カラムのもう一方の端（元の入口）に出口を取り付け、それを排水口に流します。

2. 極性が低い順に一連の溶媒を送ります。推奨される基本シリーズは、メタノールから始めて、次にアセトニトリル、次にアセトニトリル/イソプロパノール（75:25）、イソプロパノール、塩化メチレン、およびヘキサンに切り替えることです。カラム内の移動相が​​吸収性の場合は、メタノールに浸す前に水を通過させることをお勧めします。毎分1〜2ミリリットルの流量で十分であり、各溶媒の約10容量カラムをポンピングする必要があります。体積列は、列の内部空間であり、（0.7 x pi x（DI / 2）^ 2 x L）で計算されます。ここで、DIは列の内径、Lは長さです。

3. 元の移動相で使用するために準備するために、カラムにさらに10倍容量のイソプロパノールを注入します。元の移動相が​​緩衝されている場合は、元の移動相に戻る前に、イソプロパノールの後に水をカラムに通して送ります。

4. カラムを外し、裏返して、元の位置になるように（可動相がカラムの右側に入るように）再びかみ合わせます。スピーカー出力を探知機に再接続します。

どうやって

• この方法でカラムを完全に洗浄できない場合は、ジメチルスルホキシド（DMSO）とジメチルホルムアミド（DMF）の50:50混合液を使用してください。タンパク質および金属イオンの残留物は、イオン節約試薬またはエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）の溶液などの他の種類の溶媒を必要とし得る。

お知らせ

• いくつかの器具では、背骨は入口として荒い金属篩を有するであろう。この場合、カラムを元に戻すと固定相がカラムを離れるので、これはお勧めできません。よくわからない場合は、販売店にご相談ください。
• このプロセスで使用される溶媒は、摂取および吸入すると潜在的に有毒です。取り扱う際には、実験室の通常の注意を払ってください。

必要なもの

• HPLC装置
• 水
• メタノール
• アセトニトリル
• イソプロパノール
• 塩化メチレン
• ヘキサン