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冷アルコールはDNAを水性溶液から分離するために使用され、その後の遺伝子検査のために精製することを可能にします。 DNAを含む溶液にアルコールを添加することは、低温で純粋なアルコールにし、それを劣化させる酵素を減速させて、より良い抽出結果を得るための簡単な方法です。
アルコールの存在下でDNAが沈殿する (Fotolia.comからAllyson RickettsによるDNA画像)
細胞壁を破る
純粋なDNAを得るための抽出手順は、DNAが抽出される組織の全ての分子的および化学的成分を除去しなければならない。最初のステップは細胞壁の破壊を含みます。これは、細胞膜に対して腐食性であるがDNAを損傷しない様々な化学物質を用いて行われ得る。細胞を超音波処理、ホモジナイズまたは粉砕して膜を破壊することもできる。
細胞壁はその中のDNAに到達するために破壊される必要があります (Fotolia.comからのchrisharveyによるセル72イメージ)脂質を除去する
細胞壁が破壊されたら、細胞膜を構成する油脂を取り除くために洗剤を加えます。洗剤は溶液中の油脂の溶解を引き起こします。
タンパク質の除去
タンパク質および酵素は、プロテアーゼを溶液に添加することによって消化することができます。プロテアーゼはタンパク質を小さなペプチドとアミノ酸に分解します。
沈殿DNA
溶液に氷冷アルコールを添加すると、DNAが沈殿して凝集します。遺伝物質は、試料を遠心分離し、そして液体層をデカントすることによって収集することができる。それは遠心管の底に小さな沈殿物として存在するはずです。
DNAを精製する
冷アルコール溶液に再懸濁してDNAを洗浄し、数回再遠心して非常に純粋なサンプルを得ることができます。使用される典型的なアルコールはエタノールおよびイソプロパノールを含む。このプロセスは厳密なテストで非常に純粋なサンプルを残します。